O teste é realizado nas maternidades ou centros de saúde, entre o 3º e o 6º dia de vida, com a autorização dos pais, pois não é obrigatório. Este período deve ser respeitado, uma vez que, antes ou depois, o teste pode não ser fidedigno por as quantidades de marcadores no sangue não serem suficientes para serem detetadas.
Este procedimento tão simples pode rastrear 24 doenças hereditárias do metabolismo, o hipotiroidismo congénito e a fibrose quística.

As doenças hereditárias do metabolismo levam a acumulação de determinadas substâncias da alimentação, que normalmente são degradadas, mas que nestes casos não o são. Este acúmulo torna-as tóxicas para diversos órgãos e sistemas, nomeadamente para o fígado e sistema nervoso central.
Quando são detetadas precocemente, a alteração imediata para uma dieta própria, com controlo dessa substância particular, permite melhorias significativas de vida.

No hipotiroidismo congénito, os bebés têm falta de uma hormona fundamental, hormona essa que pode ser suplementada diariamente, e na maior parte das vezes para toda a vida, suprindo a sua falta.
Já a fibrose quística afeta vários órgãos e sistemas, podendo levar ao aparecimento de doenças pulmonares, alterações pancreáticas e diabetes, sendo geralmente crianças que necessitam de ser seguidas em centros especializados.

Estas doenças graves são difíceis de diagnosticar clinicamente nas primeiras semanas de vida. O teste do pezinho permite um diagnóstico atempado o que faz com que as crianças sejam encaminhadas para centros de tratamento especializado, com grande melhoria do seu prognóstico.
É simples de realizar, gratuito e, havendo doença, melhora a vida das crianças e das suas famílias, pelo que se recomenda fortemente a sua realização.